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食品大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片

1、原理及適用范圍 
        將乳糖膽鹽選擇性培養(yǎng)基和TTC顯色劑加載在紙片上，經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽性，記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。 食品大腸菌群檢驗(yàn)紙片法與國標(biāo)法中的九管法相對(duì)應(yīng)，將原來幾步的試驗(yàn)簡化為一步，時(shí)間由78h縮短為24h以內(nèi)，省去了制備培養(yǎng)基、**和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時(shí)可以打開包裝進(jìn)行抽樣檢測(cè)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品**國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)MPN計(jì)數(shù)法（GB/T 4789.3--2010）。
        適用于各類食品、飲料等樣品中大腸菌群的快速測(cè)定。
    2、操作方法 
        2.1、樣品處理：按無菌操作稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL**磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣瓶或均質(zhì)杯中，經(jīng)充分振搖做成1：10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間，必要時(shí)用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸調(diào)節(jié)。用1mL**吸管吸取1：10樣品勻液，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管制成1：100的樣品勻液。根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，按上述操作，一次制成10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換一支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過15min。 
        2.2、接種 
          2.2.1、選取兩個(gè)稀釋度進(jìn)行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個(gè)稀釋度，飲料采用原液和1：10兩個(gè)稀釋度。本品每份由三片大紙片（接10mL，袋中二片疊放算作一大片），六片小紙片（接1mL）組成。
          2.2.2、用**吸管吸取10mL 1：10樣品勻液加到含有大紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品1g），吸透后平放，做三個(gè)重復(fù)。再用1mL**吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品0.1g），做三個(gè)重復(fù)。再另取一支1mL**吸管吸取1mL 1：100樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品0.01g），做三個(gè)重復(fù)。 
       2.3、培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入36℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15～24h。

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